или
Поможем найти врача
звоните (ежедн. с 08 до 21) +7 (495) 125 29 51

Иммунологическое обследование расширенное

Описание

 Иммунологическое обследование расширенное ( 3-го уровня) позволяет конкретизировать иммунологический дефект, если таковой имеется, и может служить основанием для проведения соответствующей заместительной терапии или иммунокоррекции. 

  • Общее количество лейкоцитов, содержание лимфоцитов, гранулоцитов, моноцитов.
  • Фенотипирование лимфоцитов (субпопуляции) - CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, CD56, CD3/HLA-DR.
  • Фагоцитарная активность лейкоцитов (поглощение FITC меченных бактерий).
  • Пролиферативная активность лимфоцитов (митогенный ответ на ФГА).
  • Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК).
  • Иммуноглобулины IgG, IgA, IgM, IgE.

 Информация о состоянии различных звеньев иммунитета, используемая в диагностике первичных и вторичных иммунодефицитов, аутоиммунных, лимфопролиферативных, инфекционных, гематологических заболеваний.

 Изменения иммунологических показателей могут быть проявлением нормальной реакции организма на воздействие физиологических или патологических факторов (с различной картиной сдвигов на разных стадиях заболевания), отражать чрезмерную активацию, истощение иммунной системы, характеризовать врождённый или приобретённый дефект отдельных звеньев иммунной системы. Для интерпретации данных иммунологического исследования в комплексе со всеми клинико-анамнестическими данными конкретного пациента рекомендуем обращаться к специалистам-иммунологам.

  • Лейкоциты, лимфоциты, гранулоциты, моноциты
  • Фенотипирование лейкоцитов (субпопуляции)
  • Фагоцитарная активность лейкоцитов
  • Активационный ответ на ФГА
  • Циркулирующие иммунные комплексы общие (ЦИК)
  • Иммуноглобулины IgG, IgA, IgM.

Подготовка

 Накануне исследования необходимо исключить физические нагрузки (спортивные тренировки) и курение.

 Биоматериал на исследование необходимо сдавать натощак. Между последним приёмом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8 часов (желательно - не менее 12 часов). Сок, чай, кофе (тем более с сахаром) - не допускаются. Можно пить воду.

Показания

  • Рецидивирующие инфекции, инфекционные заболевания с хроническим и затяжным течением.
  • Подозрение на генетически обусловленный или приобретённый иммунодефицит.
  • Аутоиммунные заболевания.
  • Аллергические заболевания.
  • Подозрение на синдром приобретённого иммунодефицита (СПИД).
  • Онкологические заболевания.
  • Обследование реципиентов до и после трансплантации органов.
  • Обследование пациентов перед серъёзными оперативными вмешательствами.
  • Осложнённое течение послеоперационного периода.
  • Контроль терапии цитостатиками, иммунодепрессантами и иммуномодуляторами, глюкокортикоидами, антиметаболитами.
  • Эндокринопатии: сахарный диабет, гипо и гипертиреоз.
  • Инфекционные заболевания: вирусные гепатиты, герпетическая инфекция, туберкулез, токсоплазмоз, гельминтозы и пр.

Интерпретация результатов

Лейкоциты, лимфоциты, гранулоциты, моноциты
 Эти клетки крови ответственны за распознавание и запоминание, попавших в кровь микроорганизмов и чужеродных для организма веществ. Дифференцированный подсчет содержания в крови в % от общего числа и абсолютном количестве основных форм лейкоцитов. Описание функций и клиническую значимость см. тест лейкоцитарная формула.

Лейкоциты, абсолютное количество клеток в единице объёма:
Единицы измерения: клеток х106/л.
Референсные значения

Возраст Абс. кол-во, клеток х 106
< 1 года 9200 - 13800
1 год - 11 лет
6100 - 11400
11 - 16 лет
4000 - 8800
> 16 лет 4000 - 9000

Лимфоциты % от общего числа лейкоцитов и абсолютное количество клеток в единице объёма
Единицы измерения: %, клеток х 106/л.
Референсные значения

Возраст % Абс. кол-во, клеток х 106
< 3 мес. 5 - 78 2920 - 8840
3 мес. - 1 год 45 - 79 3610 - 8840
1 - 2 года 44 - 72 2180 - 8270
2 - 5 лет 38 - 64 2400 - 5810
5 - 16 лет 36 - 43 2000 - 2700
> 16 лет 19 - 37 1200 - 3000

Гранулоциты, % от общего числа лейкоцитов и абсолютное количество клеток в единице объёма:
Единицы измерения: %, клеток х 106/л.
Референсные значения

Возраст
%
Абс. кол-во, клеток х 106
1 мес. - 2 года
14 - 42
1800 - 7700
2 года - 9 лет
37 - 61
1520 - 6060
> 10 лет
40 - 60
1800 - 7700

Моноциты, % от общего числа лейкоцитови абсолютное количество клеток в единице объёма:
Единицы измерения: %, клеток х 106/л.
Референсные значения

Возраст
%
Абс. кол-во, клеток х 106
1 мес. - 2 года
3 - 8
270 - 1100
 > 2 лет
2 - 7
0 - 800

 Фенотипирование лимфоцитов (субпопуляции). Лимфоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития. Кластеры – это антигены на поверхности клеток, маркёры, отличающие одни типы клеток от других. Дифференциации этих антигенов - CD (cluster of differentiation antigens) изучены и стандартизованы, им присвоены определённые номера. CD могут быть распознаны с помощью соответствующих моноклональных антител. Используя флюоресцентно меченые моноклональные антитела, связывающиеся с определёнными CD, можно произвести подсчёт содержания лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям. Это позволяет понять природу некоторых заболеваний, оценить состояние пациента, прогнозировать его дальнейшее развитие, проследить за течением болезни.

 Основные субпопуляции лимфоцитов: Т-лимфоциты – лимфоциты, созревание которых происходит в тимусе (отсюда их название). Они контролируют работу В-лимфоцитов, ответственных за образование антител, т. е. за гуморальный иммунный ответ. Т-хелперы (от англ. to helh – помогать) – разновидность Т-лимфоцитов, помогающих синтезу антител. Цитотоксические Т-клетки - распознают фрагменты антигена, на поверхности клеток-мишеней, ориентируют свои гранулы по направлению к мишени и высвобождают их содержимое в области контакта с ней. При этом некоторые цитокины являются сигналом гибели (по типу апоптоза) для клеток-мишеней.

  В-лимфоциты (от лат. «bursa» - сумка по названию сумки Фабрициуса, в которой созревают эти лимфоциты у птиц) проходят развитие в лимфоузлах и других периферических органах лимфоидной системы. На поверхности эти клетки несут иммуноглобулины, функционирующие как рецепторы к антигенам. В ответ на взаимодействие с антигеном В-лимфоциты отвечают делением и дифференциацией в плазматические клетки, вырабатывающие антитела, посредством которых обеспечивается гуморальный иммунитет.

 ЕК-клетки (естественные клетки-киллеры) или натуральные киллеры-клетки с естественной, неиммунной цитотоксической активностью к неопластически изменённым клеткам-мишеням, которые не относятся ни к зрелым Т- или В-лимфоцитам, ни к моноцитам. EKT- клетки – клетки с естественной неиммунной киллерной активностью, имеющие признаки Т-лимфоцитов.

 Кластеры дифференциации (СД) антигенов. Это маркёры, по которым одни клетки отличаются от других.

 CD3 (T3; Leu-4) – поверхностный маркёр, специфичный для всех клеток субпопуляции Т-лимфоцитов. По функциям относится к семейству белков, формирующих комплекс мембранной передачи сигнала, связанный с Т-клеточным рецептором.
 CD4 (T4; Leu-3) – характерен для хелперных Т-клеток; представлен также на моноцитах, макрофагах, дендритных клетках. Он связывается с молекулами MHC класса II, экспрессированными на антигенпрезентирующих клетках, облегчая распознавание пептидных антигенов.
 CD8 (Leu-2; T8; Lyt2/3) – характерен для супрессорных и/или цитотоксических Т-клеток, ЕК-клеток, большей части тимоцитов. Это рецептор Т-клеточной активации, облегчает распознавание клеточно-связанных антигенов MHC класса I.
 CD16 (FcRIII) – используется вместе с CD56 преимущественно для идентификации ЕК-клеток. Представлен также на макрофагах, тучных клетках, нейтрофилах, некоторых Т-клетках. Это компонент рецепторов, связанных с IgG, опосредующих фагоцитоз, продукцию цитокинов и антителозависимую клеточную цитотоксичность.
 CD19 (B4) – присутствует на B-клетках, их предшественниках, фолликулярных дендритных клетках, считается самым ранним маркёром B-клеточной дифференциации. Регулирует развитие, дифференциацию и активацию B-клеток.
 CD56 (neural cell adhesion molecule-1, NCAM; NKH1) – прототипный маркёр ЕК-клеток. Помимо ЕК-клеток присутствует на эмбриональных клетках, мышечных, нервных, эпителиальных клетках, некоторых активированных Т-клетках. CD56-позитивны такие гематологические опухоли как ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, анапластическая крупноклеточная лимфома, плазмоклеточная миелома (плазмоклеточная лейкемия CD56-негативна). Это молекулы адгезии клеточной поверхности, которые облегчают гомофильную адгезию и участвуют в контактном ингибировании роста, ЕК-клеточной цитотоксичности, развитии нервных клеток.
 CD3+HLA-DR+ клеткипредставляют собой зрелые активированные Т-лимфоциты человека. HLA-DR – это один из антигенов MHC класса II.
 CD69 (activation inducer molecule, AIM; Early activation antigen, EA-1; MLR-3; Leu-23) – ранний маркёр активации, трансмембранный белок типа I. Вовлечен в ранние механизмы активации Т-клеток, ЕК-клеток, моноцитов и тромбоцитов. Формирует димеры, которые могут функционировать как трансдуктор сигнала, усиливая клеточную активацию. Экспрессируется в повышенных количествах на Т-клетках из воспалительных инфильтратов при ревматоидном артрите, вирусных гепатитах, аутоиммунных заболеваниях щитовидной железы. CD69 позитивен при ангиоиммунобластной лимфоме, лимфоме Леннерта, грибовидном микозе и\или синдроме Сезари и т.д.

Форма представления результатов иммунофенотипирования лимфоцитов

Возраст % от общего количества
лимфоцитов
Абсолютное количество
клеток х106
CD3 (Т-лимфоциты)
< 3 мес. 55 - 78 2070 - 6540
3 мес. - 1 год 45 - 79 2280 - 6450
1 - 2 года 53 - 81 1460 - 5440
2 - 6 лет 62 - 80 1610 - 4230
6 - 16 лет 66 - 76 1400 - 2000
> 16 лет 55 - 80 800 - 2200
CD3+ CD4+ (Т-хелперы)
< 3 мес. 41 - 64 1460 - 5116
3 мес. - 1 год 36 - 61 690 - 4600
1 - 2 года 31 - 54 1020 - 3600
2 - 6 лет 35 - 51 900 - 2860
6 - 16 лет 33 - 41 700 - 1100
> 16 лет 31 - 49 600 - 1600
CD3+ CD8+ (Т-цитотоксические лимфоциты)
< 3 мес. 16 - 35 650 - 2450
3 мес. - 1 год 16 - 34 720 - 2490
1 - 2 года 16 - 38 570 - 2230
2 - 6 лет 22 - 38 630 - 1910
6 - 16 лет 27 - 35 600 - 900
> 16 лет 12 - 30 190 - 650
CD19 (В-лимфоциты)
< 2 лет 19 - 31 500 - 1500
2 - 6 лет 21 - 28 700 - 1300
6 - 16 лет 12 - 22 300 - 500
> 16 лет 5 - 19 100 - 500
CD3-CD16+CD56+ (ЕК-клетки)
1 мес. - 4 мес. 2 - 14 -
4 мес. - 1 год 2 - 13 -
1 - 2 года 3 - 16 -
2 - 6 лет 4 - 23 -
6 - 12 лет 4 - 26 -
4 - 16 лет 6 - 27 -
> 16 лет 6 - 20 -
1 мес. - 2 года - 40 - 915
2 - 9 лет - 96 - 1330
9 - 16 лет - 100 - 500
> 16 лет - 150 - 600
> 1 мес. < 10
CD3+CD16+CD56+ (ЕКТ-клетки)
> 1 мес. < 10 -
CD3+/HLA-DR (зрелые активированные T-лимфоциты)
1 мес. - 4 мес. 1 - 9 -
4 мес. - 1 год 1 - 7 -
1 - 2 года 3 - 12 -
2 - 6 лет 3 - 13 -
6 - 9 лет 1 - 8 -
9 - 12 лет 3 - 14 -
12 - 16 лет 1 - 8 -
> 16 лет < 12 -
CD3+/HLA-DR+ (активированные CD3-, не относящиеся Т-лимфоцитам)
> 1 мес. 5 - 20 60 - 600

 Фагоцитарная активность лейкоцитов. Данные по фагоцитарной активности нейтрофилов и моноцитов (содержание клеток, фагоцитировавших бактерии с флюоресцентной меткой при инкубации) позволяют оценить резервные возможности этих клеток по поглощению и перевариванию чужеродных агентов.

 Форма представления результатов
  • Фагоцитирующие гранулоциты (из общего числа гранулоцитов). Единицы измерения: %. Референсные значения: 82 - 90.
  • Фагоцитирующие моноциты (из общего числа моноцитов). Единицы измерения: %. Референсные значения: 75 - 85.
 Способность лимфоцитов к активации
 Для определения функционального состояния Т-лимфоцитов исследуют способность этих клеток размножаться в ответ на введение митогенов - веществ, стимулирующих размножение, а также синтез антител.К таким веществам относится ФГА (фитогемагглютинин). Его получают из растений (семян фасоли). Лейкоциты выделяют центрифугированием, и они оседают слоями в зависимости от массы. Затем их культивируют в течение трёх суток в присутствие ФГА. Затем определяют количество молодых клеток (бластов) по отношению ко всем лимфоцитам. Один из признаков активации – появление антигена ранней активации CD69. Принцип метода – подсчёт клеток, экспрессирующих антиген ранней активации CD69 в ответ на инкубацию в присутствии с ФГА. Результат очень зависит от качества реактивов и других условий. Поэтому исследование необходимо проводить в одной и той же лаборатории. 

 орма представления результата:

  • Активированные Т-лимфоциты (CD3+CD69+) после инкубации с ФГА. Единицы измерения: %. Референсные значения: 50 -69.
  • Активированные CD3- лимфоциты (CD3-CD69+) - не относящиеся к Т-лимфоцитам клетки - преимущественно ЕК клетки и B-лимфоциты, после инкубации с ФГА. Единицы измерения: %. Референсные значения: 15 - 34.

Снижение ответа: наличие иммунодефицита.

Повышение ответа: инфекция; аутоиммунная патология.

 Циркулирующие иммунные комплексы общие (ЦИК)
 Одновременное присутствие высоких концентраций антигенов и их специфических антител может вести к образованию циркулирующих иммунных комплексов. Иммунные комплексы могут выходить из кровотока в мелких сосудах и откладываться в тканях, например, в гломерулах почек, в лёгких, коже, суставах, стенке сосудов. ЦИК обладают способностью связывать и активировать комплемент, что ведёт к повреждению ткани. Повышение уровня ЦИК может наблюдаться при аутоиммунных заболеваниях, хронических инфекционных заболеваниях, при которых постоянная продукция антигена инфекционным агентом сочетается с иммунным ответом на него (хронические гепатиты). Клинически это часто проявляется гломерулонефритами, артритами, нейропатиями. Несмотря на непосредственную роль в патогенезе некоторых заболеваний, определение ЦИК не всегда информативно, поскольку количество иммунных комплексов, отложившихся в тканях более важно, чем количество комплексов, циркулирующих в крови.

 Исследование ЦИК может быть недостаточно чувствительным и специфичным в диагностике болезней, вызываемых иммунными комплексами, и должно дополняться исследованием эффектов ЦИК на функцию органов (например, концентрация креатинина и анализ мочи), а также определением С3 С4 компонентов комплемента , количество которых снижается вследствие усиленного потребления.

 Иммуноглобулины IgG, IgA, IgM, IgE . Данные иммунологического исследования интерпретирует врач в комплексе со всеми клинико-анамнестическими данными конкретного пациента. При оценке иммунного статуса пациента результаты исследования оцениваются с точки зрения природы и стадии патологического процесса, сопутствующих заболеваний, приёма лекарственных препаратов и пр. При этом важны не только абсолютные значения отдельных показателей, но и их соотношение и динамика показателей.
Читать полность ...