или
Поможем найти врача
звоните (ежедн. с 08 до 21) +7 (495) 125 29 51

ВПЧ скрининг (4+КВМ*), вагинальный соскоб

Описание

 Лабораторная диагностика папилломавирусной инфекции - важнейший элемент скрининга и профилактики рака шейки матки (РШМ), что объясняется подтверждением этиологической роли вируса папилломы человека (ВПЧ) в развитии данного заболевания.

 Вирус папилломы человека (ВПЧ) - очень распространенная инфекция. 75% людей в мире хоть раз контактировали с ВПЧ.

 Вирус может поразить клетки слизистых и кожи только человека.

 Существуют больше 100 разных типов ВПЧ.

 Типы вируса папилломы человека

 Вирус может существовать в двух формах: вне хромосом клетки или встраиваясь в её геном. В первом случае, это доброкачественные типы вируса папилломы человека, во втором – злокачественные.

 К злокачественным относятся 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68, 73, 82 типы. Наиболее опасными считаются 16 и 18 тип (высокий риск развития рака).Все остальные типы вируса  доброкачественные.

Способ и место заражения

 Злокачественные виды передаются половым путем. Доброкачественные могут передаваться:

  • - половым путем;
  • - при оральном сексе;
  • - во время родов от матери ребенку (0,1% случаев при наличии инфекции у женщины);
  • - контактным путем.

 У женщин вирус папилломы человека атакует ткани вульвы, влагалища, шейки матки (до 40 типов ВПЧ), рот, гортань, а также ладони и ступни. Большинство типов ВПЧ имеют свою «специализацию» и не инфицируют сразу, например, и кожу рук, и влагалище. Некоторые типы наоборот могут заразить одновременно гортань и половые органы.

 Осложнения

 Злокачественные типы вируса относятся к вирусам папилломы человека высокого риска, потому что могут со временем преобразоваться в предраковые и раковые клетки.

 Доброкачественные иногда вызывают бородавки, кондиломы, иногда превращаются в предраковые образования на шейке матки, но в рак шейки матки не переходят никогда.

 Эти последствия появляются у до 5% инфицированных, в остальных случаях вирус папилломы человека не дает никаких осложнений.

 Течение болезни

 Наиболее часто встречается транспортная ВПЧ инфекция (до 90% женщин). Иммунная система распознает попавший в организм вирус и успешно борется с ним самостоятельно. ВПЧ задерживается в таких случаях на зараженной слизистой не больше года.

 Самыми «тяжелыми» последствиями при транспортной инфекции может быть дисплазия шейки матки  I степени. Этот сценарий развития болезни характерен больше для молодых женщин до 30 лет.

 При длительной ВПЧ инфекции иммунная система не справляется сама с вирусом и он остается на более длительный срок. В таком случае ВПЧ может превратить клетки слизистой в предраковые и раковые. Но это долгий процесс, который может растянуться на 10 лет. Как правило, длительная ВПЧ инфекция чаще наблюдается у женщин старше 30 (до 10% женщин).

Диагностика ВПЧ

 К сожалению, исследования не могут показать, какая именно у пациентки инфекция: транспортная или длительная. Нет возможности определить, как долго ВПЧ находиться в организме.

 Анализ на вирус папилломы человека, полимеразная цепная реакция (ПЦР), показывает наличие или отсутствие вируса и определяет его тип.

 Более информативный будет, например, цитологический тест эпителия шейки матки. Он показывает само качество клеток, пораженных ВПЧ. Они могут быть либо неизменёнными, либо предраковыми, либо раковыми.

 В связи с этим женщинам необходимо:

- до 30 лет: делать один раз в полгода цитологию шейки матки (мазок по Папаниколау или PAP-тест). Тест на ВПЧ в этом возрасте делать бессмысленно, так как очень часто встречается транспортное ВПЧ инфицирование.

- после 30 лет:сдавать анализ на ВПЧ плюс цитологический тест. В этом возрасте вирус обычно переходит в длительную инфекцию и надо отследить момент, когда клетки перейдут в предраковое состояни




 Преимуществами тестирования на ДНК ВПЧ являются простота взятия материала, автоматизация метода, унифицированность получаемых результатов, быстрота выполнения исследования, высокая специфичность у женщин старше 30 лет (у подростков и молодых женщин из-за высокого показателя спонтанной элиминации вируса клиническая интерпретация положительного результата должна проводиться с осторожностью).

 Использовавшийся ранее метод классической ПЦР, позволяющий определить факт наличия/отсутствия в биоматериале пациента ВПЧ, недостаточно информативен. Определение типа вируса позволяет оценить риск развития неоплазии и дифференцировать персистенцию вируса от случая нового заражения при динамическом наблюдении. Высокая вирусная нагрузка рассматривается как один из факторов, снижающих спонтанную элиминацию вируса и увеличивающих риск развития неоплазии. Поэтому в последнее время широкое распространение получили количественные тесты по определению клинически значимых типов ВПЧ.

 Digene-тест, основанный на методе «гибридного захвата», часто называют «золотым стандартом» диагностики папилломавирусной инфекции. Существует две модификации Digene-теста: для выявления папилломавирусов, ассоциированных с неоплазией шейки матки (типы 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68) и палилломатоза гортани (типы 6, 11, 42, 43, 44). Digene-тест позволяет выявить клинически значимое количество вируса папилломы, имеет высокую чувствительность, прогностическую ценность, однако не позволяет дифференцировать тип ВПЧ и достаточно дорог.

 Указанных недостатков лишен метод ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени (RT-PCR), позволяющем определить количество ДНК клинически значимых типов ВПЧ в образце. Результаты исследования представлены в геном-эквивалентах (ГЭ); количество ГЭ пропорционально количеству копий вируса в образце. Технологические особенности RT-PCR позволяют врачу-клиницисту подобрать оптимальный вариант диагностического лабораторного обследования каждого пациента и, при необходимости, динамического мониторинга ВПЧ.

 Стандартизация диагностических тест-систем на основе RT-PCR даёт возможность пересчёта полученных результатов в единицы Digene, поэтому все клинические рекомендации по интерпретации результатов Digene-теста могут быть применены для результатов, полученных методом RT-PCR.

 Необходимым условием корректного количественного анализа является чёткое соблюдение техники получения соскоба эпителиальных клеток, поэтому в состав пакетов по диагностике и мониторингу ВПЧ введен специальный параметр - контроль взятия материала (КВМ). КВМ представляет собой количество геномной ДНК человека в биоматериале, источником которой являются эпителиальные клетки, попадающие в пробу при правильной технике взятия биоматериала. КВМ позволяет количественно оценить адекватность взятия соскоба, а также произвести пересчёт результатов исследования на клетки человека.

 Выявляемые показатели: Индивидуальные результаты количественного определения наиболее распространённых клинически значимых типов ВПЧ (4 типа HPV + КВМ):
  • высокого онкогенного риска (HPV 16, HPV 18);
  • низкого онкогенного риска (HPV 6, HPV 11).
 Материал для исследований
  • для женщин: соскоб эпителия с границы здоровой ткани цервикального канала и шейки матки;
  • для мужчин: соскоб эпителия уретры.
 Взятие образцов урогенитальных соскобов. Для получения объективного результата необходимо, чтобы исследуемый материал содержал возможно большее количество эпителиальных клеток и минимальное количество слизи и примеси крови. Неадекватное взятие биоматериала контролируется специальным параметром – КВМ. Взятие урогенитальных соскобов проводится стерильным одноразовым зондом в пластиковые пробирки объёмом 1,5 мл с 500 мкл транспортной среды.

 Порядок взятия материала в пробирку с транспортной средой. Открыть крышку пробирки. С помощью одноразового зонда произвести соскоб эпителиальных клеток из соответствующего биотопа (цервикальный канал, уретра). Перенести зонд с биоматериалом в пробирку с транспортной средой, зонд тщательно прополаскать в транспортной среде, затем извлечь и выбросить (при необходимости взятия биоматериала из нескольких биотопов, повторить процедуру, каждый раз взятие материала должно осуществлятся новым зондом в новую пробирку). Пробирку плотно закрыть крышкой и промаркировать. В направительном бланке обязательно указать пол пациента (мужской или женский).

Особенности взятия материала из уретры:
  • перед взятием биоматериала пациенту рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5 - 2 часов; 
  • непосредственно перед взятием биоматериала наружное отверстие уретры необходимо обработать тампоном (который можно смочить стерильным физиологическим раствором); 
  • в уретру у мужчин зонд вводится на глубину 1,5-2 см.
Особенности взятия материала из цервикального канала:
  • перед взятием материала необходимо УДАЛИТЬ ватным тампоном СЛИЗЬ и затем обработать шейку матки стерильным физиологическим раствором;
  • зонд вводится в цервикальный канал на глубину 0,5-1,5 см;
  • при извлечении зонда необходимо полностью исключить его касание стенок влагалища.
Транспортировка и хранение исследуемого материала. ВНИМАНИЕ! Время от взятия материала до начала исследования не должно превышать 24 часов. Транспортировать и хранить образцы до начала исследования при +2..+8°С. В случае невозможности доставки материала в лабораторию в течение 24 часов допускается однократное замораживание материала на срок до 1 месяца.

* КВМ - Контроль достаточности взятияматериала

Подготовка

Специальной подготовки к исследованию не требуется.

Показания

Определение типа ВПЧ с количественной оценкой вирусной нагрузки рекомендуется:
  • при выявлении любых изменений на шейке матки;
  • для оценки эффективности вакцинации;
  • для контроля проводимой терапии;
  • в качестве скринингового обследования специальных групп женщин.
Стартовый возраст для начала скрининга:
  • с 21 года или в течение 3 лет после начала половой жизни;
  • с 18 лет при высокой степени сексуальной активности;
  • с 30 лет для новых программ (основанных на выявлении ДНК ВПЧ) или с 25 лет для существующих программ (классическое цитологическое исследование).
Специальные группы, которым показан скрининг:
  • женщины, имеющие в анамнезе рак шейки матки;
  • женщины в возрасте 25-65 лет, которым никогда не проводилось цитологическое исследование или проводилось более 3 лет назад;
  • женщины с кровотечением в репродуктивном периоде, кровотечениями после наступления менопаузы, посткоитальными кровотечениями.

Интерпретация результатов

 Способ представления результата. Индивидуальный количественный результат по каждому выявляемому показателю.

 Результат выдаётся в абсолютных единицах:

Lg (копий/образец). Для удобства трактовки результатов в ответе используется цветовая маркировка.

 Контроль взятия материала
  •  
    количество клеток человеческого эпителия в исследуемом образце более 104 копий/образец: достаточное для анализа количество биоматериала;
  •  
    количество клеток человеческого эпителия в исследуемом образце менее 104 копий/ образец: НЕ достаточное для анализа количество биоматериала
 Дифференцировка типов ВПЧ:
  •  
    типы ВПЧ низкого онкогенного риска
  •  
    типы ВПЧ высокого/среднего онкогенного риска
 Интерпретация результата. При обнаружении в ходе диагностики или мониторинга клинически значимых типов ВПЧ дальнейшее ведение пациентов осуществлять в соответствие с методическими рекомендациями для врачей.
Читать полность ...